阿莫西林为抗细菌口服抗生素制剂,应检查霉菌每1g中不得超过100个,因其对铜绿假单胞菌无效,还应检查铜绿假单胞菌
一、使用设备
日本ALP CL-32L高压灭菌器(亚投娱乐-追求健康提供),德国binder KBF恒温恒湿箱(亚投娱乐-追求健康提供), 离心机(kokusan提供),意大利VELP 均质器(亚投娱乐-追求健康提供)
二、霉菌的检查
配制供试液:称取供试液10g。置0.9%无菌氯化钠溶液100ml中,用意大利VELP 均质器或其它方法进行混匀,作为供试液。
三、培养基使用前处理
采用日本ALP CL-32L高压灭菌器直接对琼脂培养基,使用器皿的高压灭菌。
四、预处理:可采用以下方法
1.稀释法:将供试液注入较大的培养集中,使该供试液稀释至不具抑菌作用的浓度。
2.离心沉淀集菌法:将规定量的供试液,离心(3000r/min)30min,留底部集菌液约2ml,再稀释成原规定量的的供试液,如有不溶性药渣,可离心(500r/min)5min,取全部上层液,再集菌处理。
3.薄膜过滤法:取定量供试液至稀释剂100mI中,摇匀,以无菌操作加入装有直径约50mm,孔径不大于0.15um±0.02um微孔滤膜的过滤器内,减压抽干后,用稀释剂冲洗滤膜3次,每次50-100ml,取出滤膜备捡。
4.利用平皿菌落计数法,将供试液涂布在玫瑰红钠培养基上,在适宜的温度下进行培养,观察肉眼可见的霉菌菌落数。
五、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)的检查
检验程序:铜绿假单胞菌、分离、纯培养革兰氏染色镜检,及生化试验等步骤进行检查。
检查方祛:取胆盐乳糖培养基3份,每份100ml,两份分别加入规定量的供试液,其中一份入对照菌液作为阳性对照,第3份加入与供试液等量的稀释液作为阴性对照。培养18-24h阴性对照应无菌生长,其余2份培养液划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上培养18-24h, ;当阳性对照的平扳呈阳性菌落时,供试品的平板无菌落或无疑似菌落的生长,可判未检出铜绿假单胞菌。
铜绿假单胞菌典型菌落呈扁平,无定形,周边扩散,表而湿润,灰白色,周围时有蓝绿色扩散。如生长菌落具有上述特征或疑似者,应挑选2-3个菌落,分别接种于营养琼脂养斜面上,培养18-24小时。取培养物做革兰染色,并作氧化酶试验。
如革兰阴性杆菌、氧气酶试验阳性,及绿脓菌素试验阳性,可判检出铜绿假单胞菌。绿脓菌素阴性的培养物,应继续做硝酸盐还原产气实验、42℃生长实验、明胶液化实验均为阳性时,应判检出铜绿假单胞菌。
附:日本ALP CL-32L高压灭菌器特点
1、CL-32L 高压灭菌器的显示屏、键盘及压力表在同一个斜面上,令操作和读数都同样方便。键盘功能指示明确,并可保留预设模式,一键start即可自动完成高压灭菌器的全部工作
2、快速锁盖杆可轻松地锁紧高压灭菌器的灭菌舱盖,自动铰链使拾起各放下舱盖都毫不费力。
3、双内锁装置确保高压灭菌器操作过程中舱盖的锁紧,并使温度保持安全范围内。
4、高压灭菌器的状态图像显示,可清晰显示当前的工作状态。
5、定时空气排出,确保高压灭菌器内纯蒸汽的灭菌环境。
6、可调自动蒸气排出,使高压灭菌器灭菌完后蒸汽慢慢地自动排出。
7、ALP生产的高压灭菌器专为处理培养基设计的保温及融化功能。
8、定时启动功能,可使高压灭菌器的灭菌工作按所需日期时间启动,使您随时可以开始工作。
9、记忆功能,高压灭菌器的使用工作程序即使在断电后也不丢失,重新接上电源,程序即可恢复。
10、多选功能,ALP CL-32L高压灭菌器满足各种工作需要:①热空气或真空干燥 ②样品温度探头使灭菌更为可靠 ③自动给水④预热功能可缩短升温时间,⑤冷却风机,缩短冷却时间 ⑥打印机 ⑦记录仪
11、三种标准工作模式, CL-32L高压灭菌器组合加热、灭菌、排气、保温、融合等各步骤,适应液体、固体、废料、培养基等不同样品的处理需求。增配干燥设置,即可提供带干燥的操作模式