菌落PCR(ColonyPCR)可不必提取目的基因DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物来筛选阳性克隆。通常利用此pcr的方法进行筛选插入的目的基因或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的片断大小。
菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,菌落pcr直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为含有目的基因的阳性菌落。操作简单,快捷,灵敏度高,是有别于酶切验证的高效方法。
菌落PCR的制备方法
1.菌落PCR DNA的制备:
挑取新鲜单菌落置于 30μl 0.2%SDS 中;velp漩涡混合器上混匀15 秒;90℃热激4min;4℃ 13000rpm×1min,离心,取上清液20μL 至新的无菌离心管中,-20℃保藏。
2.菌落PCR的制备
挑取新鲜单菌落置于 20μl 水中;velp漩涡混合器上混匀15 秒;取5μl 作为PCR模板,剩余菌液放-20℃保藏。
对于菌落PCR实验室的实验员来说,一天的样品的制备量非常大,选择一款快捷、省力的漩涡混合器十分必要。同时选择一款稳定、高效的漩涡混合器也备显重要。
意大利VELP推出了创新性红外感应漩涡混合器,红外传感是VELP创新性的产品。VELP红外感应漩涡混合器,一旦检测到试管,VELP漩涡混合器自动开始震动,不需要施加任何外力,而且相比于传统的接触模式,VELP红外传感漩涡混合器能确保在震动减少过程的急剧变化。VELP漩涡混合器确保了样品的稳定性。VELP漩涡混合器最大转速可以达到3000rpm,VELP漩涡混合器可以满足大部分实验室的需求。VELP漩涡混合器技术红外感应震动可以在实验中解放您的双手,让实验更快捷、更准确!